【每周一例】冬棚养殖罗氏沼虾大量死亡，检出虾血细胞虹彩病毒（SHIV）

【病例488】广东省珠海市斗门区横山镇一罗氏沼虾养殖池塘，面积7亩，平均水深1.5m，配备3台1.5kw的叶轮式增氧机（见图1）。该养殖池塘罗氏沼虾2018年9月4日放苗，11月3日盖棚，11月上旬从原塘（母塘）过塘13万尾到该养殖池塘进行养殖。目前平均规格40头/斤。投喂饲料，吃完就喂，每天投料大约40斤。

                               
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图1  发病池塘



12月15日开始发病，当时水温约22℃，每天可见到死亡虾1~2尾。



12月下旬到1月10日连续15天左右阴雨天，天气转晴之后，开始出现大量死亡，严重时每天死亡100斤左右。



2019年1月12日，利洋药店技术员从该养殖池塘取4尾发病罗氏沼虾送研究所进行检测，经检测，送检样品白斑症病毒（WSSV）、罗氏沼虾诺达病毒（MrNV）均呈阴性，虾血细胞虹彩病毒（SHIV）呈阳性（见图2）。进一步对阳性样品PCR产物进行测序，序列比对结果显示其与GenBank中虾血细胞虹彩病毒（SHIV）序列同源性为100%。

                               
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图2  药店寄送罗氏沼虾样品病毒检测结果



1月15日下午5点到该养殖池塘现场调查。截止15日，该养殖池塘共计死虾1000斤左右，而母塘养殖的罗氏沼虾未发病。简易测试盒测定水质指标：pH值8.2、氨氮0.60mg/L、亚硝酸盐0.15mg/L；哈希溶氧仪测定水温24.1℃，上层溶解氧8.29mg/L、下层溶解氧8.35mg/L。在池塘的四周可见少量趴边的罗氏沼虾。从塘边兜起1尾趴边虾，从塘中捞5尾病虾，外观虾体微微发红，空肠空胃，肝胰腺发黄（见图3）；6只虾中3只虾触角腺呈“白点”状（见图4）。分别从6尾虾的肝胰腺接种进行细菌分离培养，并取鳃、肝胰腺和肌肉分别用95%酒精和波恩氏液固定保存，带回实验室做病毒检测和组织病理切片观察。另外从隔壁的原塘中取3尾罗氏沼虾用95%酒精固定做病毒检测。

                               
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图3  从发病养殖池塘中所取的6尾病虾

                               
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图4  个别发病虾触角腺呈“白点”状



结 果：

6尾发病罗氏沼虾中有2尾分离大量细菌（见图5），分离菌经16S rRNA测序初步鉴定为柠檬酸杆菌属的细菌。利用实验室建立的PCR方法进行检测，采集的9尾罗氏沼虾白斑综合症病毒（WSSV）、罗氏沼虾诺达病毒（MrNV）均呈阴性；发病池塘采集的6尾罗氏沼虾虾血细胞虹彩病毒（SHIV）呈阳性，从未发病的原塘采集的3尾罗氏沼虾虾血细胞虹彩病毒（SHIV）呈阴性（见图6）。组织病理切片显示：发病虾肝胰腺多有腺管崩解，少量的增生及坏死的细胞；肌肉组织比较正常，有局部组织坏死的情况；鳃组织淤血、出血、水肿较重，有增生、坏死，个别可见气泡；触角腺组织多有坏死。肝胰腺、鳃、触角腺均可观察到胞质包涵体（见图7）。

                               
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图5  采集6尾病虾的细菌分离培养结果

                               
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图6  现场采集6尾虾的病毒检测结果

                               
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图7  病虾组织病理切片结果

（A-C：肝胰腺；D：触角腺；E：鳃；F：肌肉；黑色箭头示包涵体）





1月16日，出虾。截止1月23日，原塘（母塘）罗氏沼虾一直正常。



分 析：

1、2015年我们对罗氏沼虾冬棚养殖期间大量死亡进行调查（见【病例363】），本次调查的案例与上次的发病症状、流行特点和病理切片观察结果基本相同，综合以上调查结果和PCR病毒检测结果，参考相关资料（Kathy F.J. Tang 2007，Liang Qiu 2017）初步诊断罗氏沼虾发病都是虾血细胞虹彩病毒病引起。



2、与其他对虾病毒病发病过程一样，都有诱发因素，本病例发病可能与养殖过程中直接加外塘水有关，连续阴雨天后突然转晴死亡量快速增加，天气剧烈变化加重死亡。（利洋研究所：雷燕、戚瑞荣；利洋水产药店：横山店 肖子生 提供 2019.01.24）

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