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各种各样的感染因子(包括病毒、细菌、真菌),可以影响孵化场和养殖场的南美白对虾。弧菌是一种公认的条件致病菌,可在虾体内产生弧菌病。但是,在中国有一个常规的做法是,将4到5天的虾苗(PL4-5)的盐度逐步降低,也就是将盐度从20ppt到4到5ppt甚至零,然后然后投放的养殖池塘当中。
有研究人员,已经证实了这一过程的影响,有报告称,虾苗(PLs)受到水体的盐度逐渐降低的影响,会导致虾苗体内弧菌的数量将低。然而,这些研究人员也提到,尽管这种盐度降低处理方法,使虾苗携带更少的弧菌,它是否能产生更健康的虾苗,目前尚不清楚。
一、虾病爆发,越来越早
近年来,在中国的许多养虾场有报道称,在池塘中养殖的(PL8-10)虾苗经常出现疾病症状,如:白便综合症,经常在30天内死亡,有的甚至在8-10天就开始死亡。因此有些人担心,降低盐度来实现降低弧菌浓度的方法,是否会影响南美白对虾的肠道微生物群,使其对各种环境的适应性降低,或更容易受到(潜在的)致病源攻击。
许多研究人员报告说,平衡的微生物群落结构,对保持南美白对虾的健康和预防疾病至关重要。蛭弧菌(BALO)是一组非常小的细菌,自然存在于陆地或者水生生态系统,以及各种生物体的肠道,包括虾和人类。BALO多样化非常高,但有一个共同的特征:寄生并杀死其他细菌。有显示研究工作显示,BALO可用于控制弧菌,改变或恢复微生物群落结构,并促进微生物的生长和生存。
今天,笔者与大家分享的研究是,盐度降低后,对南美白对虾肠道微生物群健康的影响。以及研究BALO对经过盐度降低处理后南美白对虾的影响,以评估BALOs是否能够恢复虾苗肠道微生物。
二、研究设计
1、本研究采用南美白对虾的规格为PL7-8(平均体长0.7至 0.8cm),来自广东省某对虾孵化场。为了满足我们研究的需要,我们将盐度调整至15ppt。这些虾苗在视觉上是健康的,没有明显的疾病迹象。
2、研究采用三组,分别为CD组(对照组,逐渐淡化盐度后,无其他操作);SD组(逐渐淡化盐度后,添加枯草芽孢杆菌);BD组(逐渐淡化盐度后,添加BALO),每组有3个塑料实验罐,一共有9个塑料实验罐,随机往每个实验罐中加入同样数量的虾苗。
3、研究一共持续了7天,每天给实验的虾苗投喂商品虾片两次,并且在整个实验期间都没有换水;每天记录水温、溶解氧(DO)、pH、记录死虾的数量,并在研究结束时计算成活率。
三、结果和讨论
1、在为期7天的实验期间,所有组的水箱中的水都相对清澈,水箱底部仅有少量饲料残渣。水温保持在28℃±0.5℃,所有组中的溶解氧保持在5±0.6 ppm,pH值在7.5至7.9范围内。
2、SD组、CD组和BD组平均死虾数分别为10±2.83尾、11±2.16尾和6±1.41尾,成活率分别为83.3%±4.7%、81.7%±3.6%和90.0%±2.4%。在3组中,BD组的虾苗累积增重百分比最高(5.51%±0.34%),存活率和累积增重百分率均最高,说明BD组虾苗生长的最好。
3、结果表明,在盐度降低后,PL肠道菌群在组成和功能上均受到显着影响 公认为机会致病菌(弧菌)也减少。γ-变形菌在实验的第一天,相对丰度为99.43%,85.61%和83.28%。第7天,SD组和CD组中γ-变形菌仍然是唯一的优势类,相对丰度分别为99.77和99.87%,而BD组中γ-变形菌的丰度下降至8.44%。
图1:BD,SD和对照组(CD)组虾苗菌群内不同细菌属的相对丰度。BD1,SD1和CD1代表实验第1天的虾苗样本,而BD7,SD7和CD7代表实验第7天的虾苗样本。
4、在生物多样性方面,Shannon多样性指数[衡量生态群落物种多样性的指标]在7天的实验期内,SD组保持不变(0.98至0.93),CD组从2.94下降到0.94,BD组从0.93上升到7.14。
5、我们的结果表明,目前在中国使用的盐度降低方法,并不能完全杀死所有弧菌,需要改进。评估数据和考虑到盐度以及增长阶段可以显著影响微生物群组成,我们觉得这是合理的建议,对于健康健壮的肠道微生物群,虾苗(PL7-15)阶段Shannon多样性指数应该在2.0或以上。低于这个值,虾苗肠道微生物群可能就不处于健康状态。在我们的研究中,与SD和CD组相比,BD组的累积体重增加百分比更高,生存率更高,这也支持了Shannon多样性指数对生长性能提高是很有帮助的。
6、我们的数据清楚地表明,在实验水体中添加有益菌,对虾苗肠道菌群的成分和功能上都有重要的积极影响,显著提高了其生物多样性,强化了其功能。
7、关于疾病控制,传统的针对特定病原体的策略似乎还不够,而且从生态管理的角度来看可能已经过时。正如其他行业人士所建议的那样,控制疾病应该考虑的比较全面,而不只是针对弧菌,并指出“操纵肠道菌群的生物多样性,可以增加宿主对病原体入侵和感染的抵抗力”。根据我们的研究结果,我们认为BALO是适用于此方法的一组微生物。
四、观点
我们的研究结果表明, 南美白对虾在进行水体盐度降低处理后,无论在成分还是功能上都受到了显着影响,但是添加BALO极大地改善了其生物多样性,并增强了其功能。
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