【每周一例】冬棚养殖罗氏沼虾大量死亡,检出虾血细胞虹彩病毒(SHIV)

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查看1471 | 回复0 | 2021-3-5 17:38:44 | 显示全部楼层 |阅读模式 来自: 中国上海

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【病例488】广东省珠海市斗门区横山镇一罗氏沼虾养殖池塘,面积7亩,平均水深1.5m,配备3台1.5kw的叶轮式增氧机(见图1)。该养殖池塘罗氏沼虾2018年9月4日放苗,11月3日盖棚,11月上旬从原塘(母塘)过塘13万尾到该养殖池塘进行养殖。目前平均规格40头/斤。投喂饲料,吃完就喂,每天投料大约40斤。

                               
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图1  发病池塘



12月15日开始发病,当时水温约22℃,每天可见到死亡虾1~2尾。



12月下旬到1月10日连续15天左右阴雨天,天气转晴之后,开始出现大量死亡,严重时每天死亡100斤左右。



2019年1月12日,利洋药店技术员从该养殖池塘取4尾发病罗氏沼虾送研究所进行检测,经检测,送检样品白斑症病毒(WSSV)、罗氏沼虾诺达病毒(MrNV)均呈阴性,虾血细胞虹彩病毒(SHIV)呈阳性(见图2)。进一步对阳性样品PCR产物进行测序,序列比对结果显示其与GenBank中虾血细胞虹彩病毒(SHIV)序列同源性为100%。

                               
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图2  药店寄送罗氏沼虾样品病毒检测结果



1月15日下午5点到该养殖池塘现场调查。截止15日,该养殖池塘共计死虾1000斤左右,而母塘养殖的罗氏沼虾未发病。简易测试盒测定水质指标:pH值8.2、氨氮0.60mg/L、亚硝酸盐0.15mg/L;哈希溶氧仪测定水温24.1℃,上层溶解氧8.29mg/L、下层溶解氧8.35mg/L。在池塘的四周可见少量趴边的罗氏沼虾。从塘边兜起1尾趴边虾,从塘中捞5尾病虾,外观虾体微微发红,空肠空胃,肝胰腺发黄(见图3);6只虾中3只虾触角腺呈“白点”状(见图4)。分别从6尾虾的肝胰腺接种进行细菌分离培养,并取鳃、肝胰腺和肌肉分别用95%酒精和波恩氏液固定保存,带回实验室做病毒检测和组织病理切片观察。另外从隔壁的原塘中取3尾罗氏沼虾用95%酒精固定做病毒检测。

                               
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图3  从发病养殖池塘中所取的6尾病虾



                               
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图4  个别发病虾触角腺呈“白点”状



结 果:

6尾发病罗氏沼虾中有2尾分离大量细菌(见图5),分离菌经16S rRNA测序初步鉴定为柠檬酸杆菌属的细菌。利用实验室建立的PCR方法进行检测,采集的9尾罗氏沼虾白斑综合症病毒(WSSV)、罗氏沼虾诺达病毒(MrNV)均呈阴性;发病池塘采集的6尾罗氏沼虾虾血细胞虹彩病毒(SHIV)呈阳性,从未发病的原塘采集的3尾罗氏沼虾虾血细胞虹彩病毒(SHIV)呈阴性(见图6)。组织病理切片显示:发病虾肝胰腺多有腺管崩解,少量的增生及坏死的细胞;肌肉组织比较正常,有局部组织坏死的情况;鳃组织淤血、出血、水肿较重,有增生、坏死,个别可见气泡;触角腺组织多有坏死。肝胰腺、鳃、触角腺均可观察到胞质包涵体(见图7)。

                               
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图5  采集6尾病虾的细菌分离培养结果



                               
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图6  现场采集6尾虾的病毒检测结果

                               
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图7  病虾组织病理切片结果

(A-C:肝胰腺;D:触角腺;E:鳃;F:肌肉;黑色箭头示包涵体)





1月16日,出虾。截止1月23日,原塘(母塘)罗氏沼虾一直正常。



分 析:

1、2015年我们对罗氏沼虾冬棚养殖期间大量死亡进行调查(见【病例363】),本次调查的案例与上次的发病症状、流行特点和病理切片观察结果基本相同,综合以上调查结果和PCR病毒检测结果,参考相关资料(Kathy F.J. Tang 2007,Liang Qiu 2017)初步诊断罗氏沼虾发病都是虾血细胞虹彩病毒病引起。



2、与其他对虾病毒病发病过程一样,都有诱发因素,本病例发病可能与养殖过程中直接加外塘水有关,连续阴雨天后突然转晴死亡量快速增加,天气剧烈变化加重死亡。(利洋研究所:雷燕、戚瑞荣;利洋水产药店:横山店 肖子生 提供 2019.01.24)


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