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本期主题 对虾白斑病毒感染通道-触角腺
疾病是虾产业健康、持续发展的限制性因素，特别是白斑病，因为它会给对虾养殖造成极其严重的经济损失。自20世纪90年代初开始，白斑病就已成为了全球甲壳纲动物养殖的最大威胁之一。白斑病的病原体是白斑综合征病毒（White spot syndrome virus，WSSV），WSSV是一种环状双链DNA包膜病毒。WSSV的基因组大小约为300 kb，包含531个公认的开放阅读框(orf)，其中181个orf可能编码功能蛋白。WSSV在虾、蟹、龙虾、小龙虾和桡足类等甲壳类动物中都具有广泛的宿主。众多研究表明，虾体消化道、肠道、胃为WSSV入侵的耙器官，口腔和消化道是WSSV的感染路径，而在对虾感染WSSV过程中，触角腺的的变化至今尚不可知。
触角腺是对虾的重要排毒器官，其功能类似于脊椎动物身体中的肾脏。触角腺位于对虾第二对触角的根部，触角腺在对虾的渗透压调节和离子调节中起重要作用。不同盐度和氨氮能显著影响触角腺的结构和功能。
强降雨通常会导致虾池池水的盐度急剧下降，这非常容易导致WSSV的爆发。当虾体抵抗力弱，对病原菌很敏感时，对虾生长环境中WSSV就很有可能从潜伏感染状态变为急性感染对虾状态。在低盐度时，WSSV会加速在对虾中的增殖速率。这些因素使得专家们考虑到了对虾感染WSSV期间，触角腺所起到的重要作用。
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中国科学院海洋研究所，海洋生物学重点实验室等团队，针对对虾触角腺进行实验研究，其研究发现：
WSSV转录产物在触角腺中特异性表达
在对虾触角腺体中发现了WSSV的18种特异性表达的转录产物，这些转录产物在对虾的其他任何组织当中都没有检出。
不同虾组织中WSSV的负载量
为了了解WSSV在虾触角腺体中的分布情况，对一百多只虾进行WSSV检测。检测结果中，大多数虾呈阳性，只有大约15%的对虾携带WSSV的水平相对较低，大概只有10-1000copies/ng DNA。推测这些低载病毒的对虾体处于病毒感染初期。为了了解WSSV在感染早期的虾体中的表达情况，选取6个低负载病毒的虾体进行qPCR检测。数据显示，触角腺体、胃和淋巴器官携带的WSSV拷贝数比其他组织的要高（图1）.
图1.低负载病毒虾体的不同组织中WSSV的负载量， Ant, 触角腺; St, 胃; Oka, 淋巴器官; Gi, 腮; Mu, 肌肉; Hp, 肝胰腺; Ht, 心脏; Hc, 血细胞.
利用透射电镜进一步了解触角腺细胞中的WSSV的复制情况，结果显示在触角腺细胞的细胞核中，观察到大量的病毒颗粒（图2）。
图2.透射电镜下触角腺细胞核中的WSSV颗粒 (A) 比例尺= 10 μm; (B) 比例尺 = 2 μm; (C) 比例尺 = 1 μm; (D) 比例尺 = 500 nm.
与水环境接触的虾体组织
众所周知，水产养殖养殖环境中存在很多病原体。为了确定哪个器官是与水环境相接触的，做了一个酚红浸渍实验。在酚红浸润两小时后，胃、肠道和第二对触角的触角腺被染红（图3）。这意味着消化道和触角腺直接接触了水生环境。因此，触角腺是病原体进入虾体的重要器官。
图3.酚红浸润后的对虾。(A) 胃染色; (B) 触角腺染色; (C) 消化道染色.
反向灌注触角腺可感染WSSV
为了确定WSSV是否真的会通过触角腺感染对虾，进行了WSSV反向灌注靶向感染触角腺实验与肌肉注射实验（阳性对照）。反向灌注实验后第三天开始出现死虾，死亡速率从第三天开始增加，7天内死亡率达到76%。肌肉注射实验后第二天开始出现死虾，死亡率从第二天开始增加，7天内死亡率达到100%。同时，在两组实验的阴性对照实验中没有明显的死虾。（图4）
图4. 反向灌注触角腺、肌肉注射后，对虾的存活率。Ant-WSSV, 触角腺反向灌注WSSV感染组; Ant-control, 反向灌注缓冲液的对照组; Mus-WSSV, 肌肉注射WSSV感染组; Mus-control,肌肉注射缓冲液的对照组
组织培养中WSSV的动态变化
为了知道体外培养的触角腺组织块中的WSSV是否复制，将接种后0、12、24、36、48小时的组织块进行qPCR检测。结果显示在培养的触角腺组织内有大量的WSSV增加（图5）。这也就意味着WSSV能够侵入体外培养的触角腺组织块中，并且在其中能够复制增殖。
图5. 0-48小时触角腺组织块中WSSV量的动态变化
通过盐度应激对WSSV反向灌注触角腺体感染的影响
触角腺有调节渗透压的功能。为了探索反向灌注感染实验中盐应激的影响，做了盐应激的影响实验。实验表明，盐应激的实验组在24小时开始，其WSSV的负载量开始明显增高，这也表明，盐应激能显著的加速WSSV在触角腺中的复制。
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