蛭弧菌讲解

蛭弧菌是寄生在某些细菌并导致其裂解的一类细菌，最早是由 德国的Stolp在土壤中发现的。蛭弧菌能防止或减少虾、蟹病害的发展和蔓延，改善虾、蟹体内外环境，促进生长，增强免疫力。市面上也出现了各式各样的蛭弧菌产品，有的产品用的很好，有的产品用的却见不到效果，很多养殖户甚至厂家都对蛭弧菌相关产品抱有疑问，本文则希望通过对蛭弧菌知识的初步梳理，为养殖户、经销商、公司更好的理解、使用蛭弧菌产品提供一些思路。

蛭弧菌是寄生于其他细菌(也可无寄主而生存)并能导致其裂解的一类细菌。它虽然比通常的细菌小，能通过细菌滤器，有类似噬菌体的作用，但它不是病毒，确确实实是一类能"吃掉"细菌的细菌。1962年首次发现于菜豆叶烧病假单胞菌体中，随后从土壤、污水中都分离到了这种细菌。根据其基本特性，命名为Bdellovibrio bacteriovorus。其中，" Bdello"一词来自希腊字,是"水蛭"的意思，"vibrio"意为"弧菌"，而种名"bacteriovorus"是 "食细菌"的意思。由于它们具有特殊的捕食生活方式以及有可能充当决定自然界中微生物种群变动的角色，因而引起了许多科学工作者的兴趣。

征

蛭弧菌属于蛭弧菌科。相差显微镜观察表明，它具有细菌的一切形态特征:单细胞，弧形或逗点状，有时呈螺旋状。大小为0.3-0.6×0.8-1.2微米，或仅为杆菌长度的1/3-1/4。端生鞭毛很少多于一根，有的在另一端生有一束纤毛。水生蛭弧菌的鞭毛还具鞘膜，它是细胞壁的延伸物，并包围着鞭毛丝状体，所以比其他细菌的鞭毛粗3-4倍，这是一个很显著的特点。蛭弧菌运动活跃，革兰氏染色阴性。细胞中蛋白质含量较高，有的占干重的60-70%。DNA含量5%，GC百分数为42-51。据报导，蛭弧菌DNA的合成是在宿主细胞DNA完全裂解后进行，宿主细胞中80%的DNA都并到寄生菌中去了，其机制还不很清楚。






到底什么是蛭弧菌？
  

（一）蛭弧菌基本资料

1、发现及命名

蛭弧菌是寄生在某些细菌并导致其裂解的一类细菌，最早是由 德国的Stolp在土壤中发现的。所以蛭弧菌从发现到现在才不过56年的时间。

“水蛭”代表了其生理上的一些动作形为，蛭弧菌的捕食生活方式很特殊，它是寄生于其他细菌并能导致其裂解的一类细菌。

2、什么是蛭弧菌

蛭弧菌也叫噬菌蛭弧菌，属于细菌界变形细菌门蛭弧菌科蛭弧菌属，具有细菌的一切形态特征：

单细胞，弧形或逗点状，有时呈螺旋状。0.3-0.6×0.8-1.2微米，或仅为杆菌长度的1/3-1/4，端生鞭毛，比其他细菌的鞭毛粗3-4倍，与鞭毛相对的一端有钉状纤毛，被称为“感染锥子”，与菌体的识别和吸附宿主有关。其运动活跃。革兰氏染色阴性。

                               
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3、生活方式及生长要求

蛭弧菌有寄生型，也有兼性寄生，极少数营腐生。非寄生型营腐生生活，可在蛋白胨和酵母提取物培养基上生长繁殖。从自然界分离得到的蛭弧菌都是依赖寄生型，迄今为止，还没有直接从自然界分离得到非寄生型。不依赖宿主的蛭弧菌，只能生活在实验室条件下。

寄生型蛭弧菌生长，一般要求pH6.0-8.5；温度23-37℃，低于12℃，高于42℃时均不生长；能稳定分解蛋白质，一般不利用碳水化合物，而以肽、氨基酸作碳源和能源；能液化明胶；严格好氧。

——所以请注意以下几点：

第一、温度不在适宜范围的时候，蛭弧菌是不生长的，所以使用时要充分考虑这一点。比如3、4月份用它用泡苗，效果肯定不会好，但如果改成拌料投喂，会对肠道控菌产生积极影响。

第二、蛭弧菌的繁殖是需要氧气的，使用的时候也建议在早上8-10点使用，这样可以获得较为充足的溶氧。另外，其耗氧不会达到非常剧烈的程度，因为其繁殖时一般要4-6小时。

4、寄生的特异性问题

蛭弧菌与宿主细胞之间，常表现出一定的特异性。不过，有的特异性较差，能侵入多种细菌。例如不同的蛭弧菌菌株，能侵入各类不同的植物病原菌。




从这一点上看，其比噬菌体（病毒）、细菌素（蛋白质）的广谱性要好。实际上蛭弧菌可感染许多不同科属的菌，但其总体上有一定偏向性，比如其可感染大多数革兰氏阴性细菌（如志贺氏菌属、沙门氏菌属、埃希氏菌属、欧文氏菌属、变形杆菌属、弧菌属、假单胞菌属、钩端螺旋体等微生物），但只对少数的革兰氏阳性（如粪链球菌、乳酸菌等）细菌感兴趣，比如其就不裂解枯草杆菌，同时也有报道指出其对某些真菌和肠道病毒也有一定的裂解活性。

5、蛭弧菌为什么用双层平板而不用单层平板法检测？

主要的原因在于培养皿底部并不是十分平整，因此注入少量培养基铺平底部作为下层，会获得几近水平的底部，然后在上面将噬菌体和细菌混合物的培养基（比较薄）注入作为上层，这样使得观察物在同一平面，更利于噬菌斑的观察及分离纯化。

实际上单层平板法与双层平板法所形成的噬菌斑的比较图如下：

                               
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6、安全性问题

王亚丽（2007年）的研究指出，将分蛭弧菌离株BD5W以107pfu/mL浓度给小鼠灌胃，试验组和对照组均健康，证明噬菌蛭弧菌对小鼠没有毒性作用。

林茂等（2010年）的研究也证实了蛭弧菌作为一种微生态制剂的无毒无害特点。




徐懿（2011年）在噬菌蛭弧菌BD57的急性毒性试验研究指出，根据《兽药试验技术规范汇编》的要求选用小白鼠进行了急性毒性试验。分别采用灌胃和腹腔注射法进行了急性毒性试验，试验结果表明，噬菌蛭弧菌 BD57 对小鼠没有毒性作用。

陈丽芸（2012年）的研究也指出，至今没有发现蛭弧菌对真核细胞有毒的报道，对小白鼠、豚鼠、家兔等动物无毒性作用，对猴肾、Hela细胞组织培养也未引起细胞病变。迄今为止，相关报道表明蛭弧菌对人和某些动物无毒害作用。




运用价值

由于上述特性，使蛭弧菌具有很大的潜在应用价值，很可能成为生物防治有害细菌的一种有力武器，首先，它有可能用于净化水体和清除工、农、医等方面的有害细菌。在农业上，有人将水生蛭弧菌跟引起水稻白叶枯病的黄杆菌混合在一起，加入农田灌溉水中，由于蛭弧菌以黄杆菌为"食料"，使灌溉水中该致病菌大大减少。对大豆痘病、柑桔溃疡病、棉花凋萎病的致病菌也具较强的侵染力，因而它可能成为人类与农业致病进行斗争的有力武器。在医学上，有的蛭弧菌对伤寒杆菌、副伤寒杆菌、痢疾杆菌等人畜致病菌也有很强的裂解作用。例如，有人用蛭弧菌有效地防治了由弗氏志贺氏菌引起的兔角质结膜炎和肠道疾病。蛭弧菌的防治作用，或者防止感染，或者明显地减少疾病的持续时间和严重程度。当用蛭弧菌和志贺氏菌混合接种时，在肠中的志贺氏菌的数量大幅度减少。然而，给动物强行喂养蛭弧菌则未获得成功效果;第二，这类细菌大量存在于污水中，对大肠杆菌和沙门氏菌属的细菌均有广泛的寄生性，因此，有人以蛭弧菌作为水域污染程度的一项最终指标(一般是以大肠杆菌的含菌数/毫升作为水源污染的指标)。



值得注意的是:它对一些有益的细菌如固氮菌等亦有裂解作用。在理论研究中，蛭弧菌同样具有十分重要的意义。特别是宿主细菌-蛭弧菌-蛭弧菌噬菌体这个"三位一体"的寄生系统，更引人注目。因为这一系统充满了"你死我活"的矛盾和斗争，优胜者得对生存和发展，失败者遭致危害和毁灭。人们可以通过这一系统，从正反两个方面去研究的利用"生命之战"的拮抗体系为人类服务。例如，蛭弧菌对宿主细胞周质空间的高度适应力的致死力，不论对致病的有害细菌还是非致病的有益细菌都是相等的。这一现象给我们提出了一系列的问题:它们的适应力和致死活力是否有着共同的作用机制?这种作用受何因子控制......?弄清这些问题，对于广泛应用将起到更大的指导作用。


蛭弧菌使用方法






推荐在脱壳期之前使用，达到无刺激生物消毒这个效果。

1、脱壳期是这些养殖动物特别脆弱的时期，容易感染相关疾病，温度升高更为严重；另外，脱壳期甲壳类动物特别敏感，很多强力消毒剂是不能使用的，而蛭弧菌则可以做到安全无刺激；使用上，建议提前2天左右使用，如果能先使用一些补钙产品之后再使用蛭弧菌那就更好了，因为一定量的钙离子可以促进蛭弧菌的繁殖。

2、推广“配合化学消毒剂治疗疑难杂症”。

到了养殖中后期，在温度高的时候，有些疾病非常难以治疗，主要的特点是止不住、易反复，这个原因主要在于化学消毒剂虽然具备了快速杀菌的效果，但其反弹也非常迅速，一般普通的化学消毒剂或者国标抗生素，使用后24-48小时，水体的总菌数甚至弧菌数可能比用前还要高，这可能是难以治疗的主要原因。

为了让杀菌即迅速又持久，则必须结合使用化学消毒剂和蛭弧菌。首先使用化学消毒剂对水底、水面进行综合消毒，同时内服国标抗生素进行体内消毒，在见到效果之后，再连续使用1-2次蛭弧菌，就可以看到明显不同的治疗效果。因为化学消毒剂起到了快速压制的效果，而蛭弧菌则起到了长期压制有害菌的效果，强强联合，能有效的抑制有害菌的繁殖。

3、建议预防使用，降低发病率

在使用过硫酸氢钾底改片后，第二天可以大剂量使用有益菌，此时建议使用蛭弧菌和光合细菌一起混合使用，这一点已通过试验证明是可行的。

当然也可以按20天一个周期，先行使用光合细菌，一周后再使用蛭弧菌原装冻干粉，也能达到比较好的使用效果。

4、建议拌料防治肠炎

蛭弧菌其实主要针对大肠杆菌引起的相关肠炎疾病，因为在发酵蛭弧菌之前，必须先行生产大肠杆菌，再将蛭弧菌接种进去，大肠杆菌是蛭弧菌最为喜爱的细菌之一，因此其治疗此类肠炎效果会更好一些。

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蛭弧菌阴天 雨天也可以用吗

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